银屑病，中医称“白疕”，是一种复杂的多因素炎症性免疫介导皮肤病，以角质形成细胞异常增殖为核心特征，临床表现为边界清晰的红斑鳞屑性斑块，具有遗传倾向和反复发作的特点，严重影响患者的身心健康。
中医理论普遍认为，银屑病的发病根源在于肾虚气亏、气血瘀滞，而金匮肾气汤源自《金匮要略》，是温补肾阳、活血化瘀的经典方剂，临床应用已延伸至糖尿病、神经管缺陷等多种疾病，其在银屑病治疗中的潜在价值备受关注。尽管金匮肾气汤的抗炎、免疫调节潜力已得到证实，但针对银屑病的具体治疗效果及分子机制尚未明确。
南京大学联合深圳职业技术学院团队在《Phytomedicine》发表的最新研究，通过多组学分析结合体内外实验，系统揭示了金匮肾气汤靶向PAD4抑制NETs形成的抗银屑病作用机制，为传统中药方剂的现代化应用提供了坚实的科学支撑。
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金匮肾气汤的成分鉴定
为明确金匮肾气汤发挥药效的物质基础，研究团队采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术（UPLC-Q-TOF-MS/MS），在正、负离子电离模式下对其水提物进行成分分析，获得总离子流色谱图（图1）。通过与质谱数据库比对及文献验证，从正离子模式下鉴定出22种主要单体化合物，负离子模式下鉴定出51种，其中包括L-苹果酸、柠檬酸等已被证实具有银屑病治疗潜力的三羧酸循环代谢物，以及多种源自熟地黄、附子、山药等组方药材的活性成分。这些多成分协同作用的特点，为金匮肾气汤多靶点干预银屑病病理过程提供了物质基础。
图1
金匮肾气汤逆转小鼠银屑病进展并恢复皮肤稳态
研究团队采用咪喹莫特（IMQ）涂抹小鼠背部皮肤构建银屑病样模型，将实验小鼠随机分为假手术组、模型组、金匮肾气汤低剂量组（10g/kg）、高剂量组（20g/kg）及地塞米松阳性对照组（1.0mg/kg），连续给药5天并进行系统检测（图2A）。结果显示，金匮肾气汤治疗可显著改善小鼠银屑病样皮损外观（图2B），激光散斑血流灌注成像证实其能减少皮损区血液灌注量（图2C、E），HE染色结果显示其可明显降低表皮厚度，缓解组织病理损伤（图2D、F）。临床评分结果表明，与模型组相比，金匮肾气汤干预后小鼠皮肤的厚度、红斑、鳞屑及综合临床评分均呈剂量依赖性显著降低（图3A-D）。分子水平检测显示，金匮肾气汤可显著下调Il17a、Il23、Tnfa、Il1b、Il6、Cxcl1等银屑病相关炎症细胞因子和趋化因子的mRNA表达水平（图3E），充分证实金匮肾气汤能有效逆转银屑病进展，抑制炎症反应，恢复皮肤生理稳态。
图2
图3
蛋白质组学显示金匮肾气汤治疗后银屑病样小鼠中参与中性粒细胞胞外诱捕网形成的PAD4显著下调
为挖掘金匮肾气汤治疗银屑病的关键靶点，研究团队对假手术组、模型组及金匮肾气汤高剂量组小鼠皮肤组织进行蛋白质组学分析。主成分分析显示，金匮肾气汤治疗组的蛋白表达模式与假手术组更为接近，而与模型组明显分离，证实药物干预可逆转银屑病相关的蛋白表达异常（图4A），热图分析进一步验证了三组间的蛋白表达差异特征（图4B）。差异表达蛋白筛选结果显示，与模型组相比，金匮肾气汤治疗后HAL（组氨酸氨裂解酶，具有皮肤保护作用）、SERPINA3J（丝氨酸蛋白酶抑制剂，可抑制NETs形成）等蛋白显著上调，而S100A8、S100A9、PAD4等中性粒细胞相关蛋白显著下调（图4C），且这些下调蛋白在模型组中均呈高表达状态（图4D）。KEGG通路富集分析发现，差异表达蛋白主要富集于IL-17信号通路、TNF信号通路及中性粒细胞胞外诱捕网形成等与银屑病发病密切相关的通路（图4E、F），其中PAD4作为NETs形成的核心调控分子，被明确鉴定为金匮肾气汤治疗银屑病的关键作用靶点。
图4
金匮肾气汤靶向PAD4抑制中性粒细胞的中性粒细胞胞外诱捕网形成
为验证蛋白质组学发现，研究团队从健康人外周血中分离中性粒细胞，经佛波酯（PMA）诱导NETs释放后，给予2%、5%、10%浓度梯度的金匮肾气汤含药血清及PAD4特异性抑制剂GSK484干预（图5A）。免疫荧光染色结果显示，金匮肾气汤可剂量依赖性地减少NETs标志性分子瓜氨酸化组蛋白H3（CitH3）、髓过氧化物酶（MPO）与中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）的共定位区域（图5B）。功能检测表明，金匮肾气汤能显著降低中性粒细胞上清液中双链DNA（dsDNA）含量，抑制MPO和NE的释放，且该抑制作用随药物浓度升高而增强，持续时间长达2小时（图5C-E、图6A-B）。为进一步证实金匮肾气汤对PAD4的靶向作用，研究构建了PAD4过表达HL-60细胞株，结果显示该细胞株可显著促进dsDNA释放，而金匮肾气汤能有效逆转这一效应，其作用效果与GSK484相当（图7A-D），明确证实金匮肾气汤通过直接靶向PAD4，抑制中性粒细胞来源的NETs形成。
图5
图6
图7
金匮肾气汤抑制银屑病样小鼠皮损中中性粒细胞胞外诱捕网形成及PAD4表达
在动物体内层面，免疫荧光染色显示，金匮肾气汤治疗可显著减少银屑病样小鼠皮损区CitH3与NE的共定位，Pearson相关系数及共定位面积定量分析均验证了这一结果（图8A-C），且高剂量组的抑制效果更为显著。免疫组织化学和Western blot实验进一步证实，与模型组相比，金匮肾气汤干预后小鼠皮损组织中PAD4的蛋白表达水平显著降低（图8D-E），从体内层面验证了金匮肾气汤对PAD4及NETs形成的抑制作用，阐明了其改善银屑病进展的核心分子机制。
图8
代谢组学显示金匮肾气汤影响银屑病样小鼠与正常小鼠皮肤中的D-精氨酸和D-鸟氨酸代谢
为深入探究金匮肾气汤的作用机制，研究团队对假手术组、模型组及金匮肾气汤高低剂量组小鼠血浆进行代谢组学分析。主成分分析显示，各组样本在正、负离子模式下均能有效分离，证实药物干预可显著改变银屑病小鼠的代谢谱（图9A）。代谢通路富集分析发现，金匮肾气汤主要影响D-精氨酸和D-鸟氨酸代谢、嘧啶代谢等与免疫调节和细胞增殖相关的通路（图9B）。进一步检测表明，金匮肾气汤可显著降低银屑病样小鼠皮肤组织中的精氨酸酶活性，下调精氨酸酶1（Arg1）的mRNA表达水平（图9C-D），通过抑制精氨酸向鸟氨酸的转化，调控相关代谢通路平衡。差异代谢物分析显示，模型组中多种烯酸、羟基十二烷二酸等代谢物显著升高，而金匮肾气汤治疗后，N-月桂酰谷氨酰胺、精氨酰赖氨酸、2-氨乙基膦酸等具有抗炎潜力的代谢物显著富集（图9E），为理解金匮肾气汤的综合治疗效应提供了代谢层面的证据。
图9
小结
该研究通过多组学分析结合体内外实验，系统阐明了金匮肾气汤治疗银屑病的药效及分子机制，证实该经典方剂可通过靶向PAD4抑制中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）形成，同时调控D-精氨酸和D-鸟氨酸代谢通路，降低炎症因子释放，改善皮肤病理损伤。金匮肾气汤作为多成分、多靶点的传统中药方剂，其作用机制涵盖了NETs形成调控、炎症抑制及代谢调节等多个层面，相比单一靶点药物具有独特优势。该研究不仅为金匮肾气汤的临床应用提供了科学依据，也为银屑病的中医治疗开辟了新路径，同时验证了多组学技术在传统中药机制研究中的应用价值。
参考文献：
Zhao W, Liu X, Tang J, Chen J, Liu D, Sun H, Qu J, Sun Y, Ouyang Z. Jinkui Shenqi decoction targets PAD4 to restrain NETosis and ameliorates psoriasis progression. Phytomedicine. 2025 Apr;139:156543. doi: 10.1016/j.phymed.2025.156543. Epub 2025 Feb 19. PMID: 40010032.
